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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
糖份子个人的有难度性和许许多多N-glycoproteins低把你想表达出来横向让对N-glycosylation成分的定性分析的描绘尤为有难度。在查重低丰度的N糖基化装饰球淀粉酶质或肽段时,进来夹杂着大批未装饰的球淀粉酶质肽断,这很加容易将低丰度的糖基化装饰球淀粉酶质肽段的移动信号消除。凝素亲和法是如今糖球淀粉酶质质组学中运用范围广泛的破乳聚集的办法。凝集素(lectin)是类糖紧密联系球淀粉酶质质,能专心辨认某种特俗成分的单糖或聚糖中当前的糖基编码序列而与之紧密联系,我们与糖链可逆转非共价紧密联系,糖球淀粉酶质或糖肽被凝集素阻止在这之后,基本用当前的单糖按照激烈紧密联系凝集素将糖球淀粉酶质或糖肽过柱过来。 血清酶质历经酶解后使用凝集素(lectin)聚集N-糖基化肽段,然后呢用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中切掉连入在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该使用处理因为Asn原子量加入2.9890Da。第四用高高精准度LC-MS质谱仪加测脱糖后的肽段,经由数值检索数值库,根本脱糖后原子量与它实际原子量的变化规律同时糖基化呈现肽段的回文序列,导致判定该血清酶质的N-糖基化位点。N-糖基化位点判定最后,再使用label-free的道理对其使用酶联免疫法阐述。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
涉及服务
蛋白鉴定,蛋白质组,多肽组学,靶向蛋白质,修饰蛋白质组,代谢组,非靶代谢,靶向代谢,医学全靶代谢,植物广靶代谢,测序,转录组,基因组,微生物组,ncRNA,IP-seq,生信分析
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